黃酮類化合物是植物體內一類低相對分子質量的次級代謝產物，大都呈黃色或淡黃色。黃酮類化合物在植物體內多數與糖結合成糖苷形式存在，少數以游離苷元形式存在。黃酮類化合物作為一種功能成分，具有優良的抗氧化活性及多種藥理和保健性能，如黃芩、洋薊等有護肝功效，異黃酮能美容、預防衰老。近年來國內外相繼開發出黃酮類的茶葉、牙膏、口香糖等產品，目前更注重研發純度更高的保健品和藥品。研究發現大豆、花(hua)生(sheng)、油菜(cai)籽中黃(huang)酮類化(hua)合(he)物(wu)含量豐(feng)富(fu)，且來(lai)源廣泛、價格低廉(lian)，適合(he)作為提取(qu)(qu)黃(huang)酮類化(hua)合(he)物(wu)的原料(liao)。本文對(dui)此類黃(huang)酮類化(hua)合(he)物(wu)提取(qu)(qu)方法的研(yan)究現(xian)狀進行詳(xiang)細介紹。
黃酮類化合物簡介
黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)化(hua)合(he)物(wu)(wu)(wu)廣(guang)(guang)泛存(cun)在(zai)于(yu)(yu)(yu)(yu)蔬菜、水(shui)果(guo)及藥用植(zhi)物(wu)(wu)(wu)的(de)花、果(guo)、葉部位，以蕓香科(ke)(ke)(ke)、唇(chun)形(xing)科(ke)(ke)(ke)、豆(dou)科(ke)(ke)(ke)、傘(san)形(xing)科(ke)(ke)(ke)、銀杏科(ke)(ke)(ke)、菊(ju)科(ke)(ke)(ke)植(zhi)物(wu)(wu)(wu)中居多(duo)。根(gen)據C3部分形(xing)成(cheng)(cheng)方式(氧(yang)化(hua)、取代、成(cheng)(cheng)環)的(de)差(cha)異(yi)，可將其(qi)分為黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、二(er)氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)醇(chun)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、二(er)氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)醇(chun)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、查(cha)兒酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、異(yi)黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、花色素、雙(shuang)(shuang)(shuang)黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)等。不同植(zhi)物(wu)(wu)(wu)中黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)化(hua)合(he)物(wu)(wu)(wu)的(de)種類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)差(cha)異(yi)較(jiao)大：黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、二(er)氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)廣(guang)(guang)泛分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)被(bei)(bei)子植(zhi)物(wu)(wu)(wu);黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)醇(chun)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(山萘酚和(he)槲(hu)皮素)和(he)二(er)氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)醇(chun)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)多(duo)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)雙(shuang)(shuang)(shuang)子葉植(zhi)物(wu)(wu)(wu)，二(er)氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)醇(chun)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)還(huan)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)豆(dou)科(ke)(ke)(ke)、薔薇科(ke)(ke)(ke)植(zhi)物(wu)(wu)(wu);查(cha)兒酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)主要(yao)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)菊(ju)科(ke)(ke)(ke)、豆(dou)科(ke)(ke)(ke)、萵苣苔(tai)科(ke)(ke)(ke)植(zhi)物(wu)(wu)(wu);異(yi)黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)和(he)花色素類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)多(duo)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)被(bei)(bei)子植(zhi)物(wu)(wu)(wu)，如豆(dou)科(ke)(ke)(ke)、桑科(ke)(ke)(ke)及鳶尾科(ke)(ke)(ke);黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)烷類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)主要(yao)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)含鞣(rou)質的(de)木本和(he)蕨類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)植(zhi)物(wu)(wu)(wu);橙(cheng)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)多(duo)存(cun)在(zai)于(yu)(yu)(yu)(yu)玄(xuan)參科(ke)(ke)(ke)、菊(ju)科(ke)(ke)(ke)、萵苣苔(tai)科(ke)(ke)(ke)及單子葉植(zhi)物(wu)(wu)(wu);雙(shuang)(shuang)(shuang)黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)分布(bu)(bu)(bu)于(yu)(yu)(yu)(yu)除松科(ke)(ke)(ke)以外的(de)裸子植(zhi)物(wu)(wu)(wu)。黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)化(hua)合(he)物(wu)(wu)(wu)的(de)性(xing)質與其(qi)結構密切相關，在(zai)實際應(ying)用中，應(ying)根(gen)據植(zhi)物(wu)(wu)(wu)及黃(huang)(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)(tong)(tong)(tong)類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)化(hua)合(he)物(wu)(wu)(wu)的(de)種類(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)(lei)、結構，選擇(ze)合(he)適的(de)提取方法(fa)。
油料作物(wu)中(zhong)的黃酮類化合物(wu)
油(you)料作(zuo)物(wu)是我(wo)國最重(zhong)要的(de)農產品之(zhi)一，也(ye)是人們(men)的(de)生活必需(xu)品，可(ke)分(fen)為草本油(you)料作(zuo)物(wu)和(he)木(mu)本油(you)料作(zuo)物(wu)，我(wo)國以草本油(you)料作(zuo)物(wu)為主(zhu)，其中大豆、花(hua)生和(he)油(you)菜籽的(de)產量占國內油(you)料總(zong)量的(de)80%，是居(ju)民消費(fei)的(de)主(zhu)要品種(zhong)。這3種(zhong)油(you)料作(zuo)物(wu)不僅經濟易得，而且黃(huang)酮類(lei)化(hua)合(he)(he)物(wu)含(han)量豐富，可(ke)作(zuo)為黃(huang)酮類(lei)化(hua)合(he)(he)物(wu)的(de)提取原料。其他油(you)料作(zuo)物(wu)由(you)于種(zhong)植面積較少或黃(huang)酮成(cheng)分(fen)含(han)量有(you)限(xian)，開發較少，因此本文(wen)主(zhu)要針對大豆、花(hua)生和(he)油(you)菜籽，分(fen)析(xi)其中的(de)黃(huang)酮成(cheng)分(fen)及合(he)(he)適的(de)提取方(fang)法。
化學法、光譜分(fen)(fen)析、HPLC是功能物(wu)(wu)質常用的(de)(de)分(fen)(fen)析技術(shu)，常被用來檢測油(you)料(liao)中(zhong)的(de)(de)黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)類(lei)化合(he)物(wu)(wu)。研究發現大(da)(da)豆莢殼(ke)、豆粕、豆渣(zha)中(zhong)均含(han)較(jiao)多黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)，龔凌霄、Mirzaei等(deng)(deng)(deng)運用HPLC、化學法、紫(zi)外(wai)(wai)光譜對大(da)(da)豆中(zhong)黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)化合(he)物(wu)(wu)進行鑒定，發現大(da)(da)豆中(zhong)主(zhu)(zhu)要(yao)(yao)含(han)異黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)，如大(da)(da)豆黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)苷(gan)、大(da)(da)豆黃(huang)(huang)(huang)(huang)素、染(ran)料(liao)木(mu)苷(gan)和(he)染(ran)料(liao)木(mu)素等(deng)(deng)(deng)，且其含(han)量(liang)與大(da)(da)豆品(pin)種有很大(da)(da)關系。紅(hong)(hong)衣(yi)是花(hua)(hua)生中(zhong)黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)最(zui)豐(feng)富(fu)的(de)(de)部位，張(zhang)秀堯(yao)等(deng)(deng)(deng)運用紅(hong)(hong)外(wai)(wai)光譜和(he)紫(zi)外(wai)(wai)光譜，杜蕾利用有機(ji)化合(he)物(wu)(wu)的(de)(de)官能團反應，對花(hua)(hua)生衣(yi)進行分(fen)(fen)析鑒定，結(jie)果發現黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)主(zhu)(zhu)要(yao)(yao)為花(hua)(hua)色苷(gan)、黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)、二氫黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)。除紅(hong)(hong)衣(yi)外(wai)(wai)，花(hua)(hua)生植(zhi)株(殼(ke)、莖、葉、根)也含(han)有黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)，以(yi)花(hua)(hua)生殼(ke)中(zhong)含(han)量(liang)最(zui)多，主(zhu)(zhu)要(yao)(yao)為木(mu)犀草(cao)素和(he)圣(sheng)草(cao)酚(fen)等(deng)(deng)(deng)。油(you)菜中(zhong)油(you)菜花(hua)(hua)粉富(fu)含(han)黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)化合(he)物(wu)(wu)，楊必成(cheng)等(deng)(deng)(deng)采用HPLC技術(shu)對油(you)菜花(hua)(hua)粉進行分(fen)(fen)析，結(jie)果顯示(shi)油(you)菜花(hua)(hua)粉中(zhong)主(zhu)(zhu)要(yao)(yao)黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)為槲皮素、山萘酚(fen)、異鼠李素。此外(wai)(wai)，油(you)菜籽(zi)餅中(zhong)也含(han)有少量(liang)異黃(huang)(huang)(huang)(huang)酮(tong)(tong)成(cheng)分(fen)(fen)。
黃酮類化合(he)物提取(qu)方法
黃酮(tong)類(lei)化合物(wu)(wu)的(de)提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)方法(fa)主(zhu)要(yao)有有機(ji)溶(rong)劑提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)、超聲波輔助提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)、微波輔助提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)、超臨界流體萃取(qu)(qu)法(fa)、酶提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)、半(ban)仿生提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)等(deng)，目前油料作物(wu)(wu)中黃酮(tong)類(lei)化合物(wu)(wu)的(de)提(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)方法(fa)主(zhu)要(yao)為(wei)前4種，其特點如表1所(suo)示。
1.有(you)機溶劑(ji)提取法
有機溶(rong)劑提取(qu)法利用相似相溶(rong)的(de)原理，依據植物中有效(xiao)成(cheng)分(fen)在不同溶(rong)劑中溶(rong)解性的(de)差(cha)異，將(jiang)有效(xiao)成(cheng)分(fen)從原料中浸。常用的(de)溶(rong)劑有乙醇、甲(jia)醇、乙醚等(deng)，因(yin)最常用的(de)溶(rong)劑是乙醇，此法被稱為醇提法。醇濃(nong)(nong)度是影響此法提取(qu)效(xiao)果的(de)決(jue)定(ding)性因(yin)素，高濃(nong)(nong)度乙醇(90%～95%)適用于(yu)提取(qu)黃酮(tong)苷元類(lei)(lei)，低濃(nong)(nong)度乙醇(60%)適用于(yu)提取(qu)黃酮(tong)苷類(lei)(lei)。
有機溶劑提(ti)取(qu)(qu)法(fa)是目前應用最(zui)(zui)廣，唯一實現工業化的提(ti)取(qu)(qu)方法(fa)。趙衛星(xing)等以(yi)80%乙(yi)(yi)(yi)醇為(wei)溶劑提(ti)取(qu)(qu)大豆莢殼中類黃(huang)酮(tong)，最(zui)(zui)優條件(jian)下以(yi)10∶1液料(liao)比(bi)(bi)在(zai)70℃條件(jian)下提(ti)取(qu)(qu)24h，提(ti)取(qu)(qu)率(lv)可達8.58%。運(yun)用此(ci)法(fa)提(ti)取(qu)(qu)豆粕中異黃(huang)酮(tong)，其粗(cu)提(ti)物經(jing)大孔吸附樹脂分離純(chun)化后(hou)，產品純(chun)度顯著提(ti)高。以(yi)60%乙(yi)(yi)(yi)醇為(wei)有機溶劑，以(yi)1∶300料(liao)液比(bi)(bi)在(zai)pH2.5和(he)40℃條件(jian)下提(ti)取(qu)(qu)黑花(hua)(hua)生衣45min，總黃(huang)酮(tong)提(ti)取(qu)(qu)率(lv)為(wei)74.7mg/g。以(yi)50%乙(yi)(yi)(yi)醇提(ti)取(qu)(qu)花(hua)(hua)生粕3h，最(zui)(zui)優條件(jian)下總黃(huang)酮(tong)提(ti)取(qu)(qu)率(lv)為(wei)1.60mg/g。以(yi)95%乙(yi)(yi)(yi)醇提(ti)取(qu)(qu)油菜蜂(feng)花(hua)(hua)粉(fen)中黃(huang)酮(tong)物質，經(jing)HPLC分析發現，槲(hu)皮素(su)(su)、山萘酚、異鼠(shu)李素(su)(su)三者含量分別為(wei)0.928%、0.295%、0.0834%。
有機溶劑提取(qu)(qu)法操作簡單、生產成本低(di)、浸出雜質少，而溫(wen)度、時(shi)間(jian)(jian)、料(liao)液比(bi)是影響(xiang)提取(qu)(qu)率(lv)的(de)主要(yao)因素。為(wei)了(le)獲得高提取(qu)(qu)率(lv)，往(wang)往(wang)需要(yao)提高溫(wen)度，延長提取(qu)(qu)時(shi)間(jian)(jian)，但(dan)容易破壞(huai)原料(liao)中的(de)黃酮(tong)類化合物，導致其(qi)生物活性降低(di)，因此有機溶劑提取(qu)(qu)法適(shi)于提取(qu)(qu)熱(re)敏性較低(di)的(de)物料(liao)。若能與其(qi)他(ta)技(ji)術如超(chao)聲波、微波等相結合，縮(suo)短提取(qu)(qu)時(shi)間(jian)(jian)、降低(di)提取(qu)(qu)溫(wen)度，將更有助于黃酮(tong)類化合物的(de)提取(qu)(qu)。
2.超聲波輔助提取法
超聲波輔(fu)助(zhu)提(ti)取(qu)法是利用超聲波產(chan)生強烈振動(dong)、高加速度(du)、空化以及攪(jiao)拌作用加速提(ti)取(qu)液(ye)的(de)(de)振蕩，促進溶質(zhi)擴散(san)，破壞細胞膜促進黃酮類化合物(wu)的(de)(de)釋(shi)放(fang)與溶出，目前在食品工業中應用較為廣(guang)泛。
超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)波(bo)(bo)輔助(zhu)提(ti)(ti)取(qu)(qu)法的(de)影響因素主要為料液比、超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)波(bo)(bo)功(gong)率(lv)(lv)(lv)、提(ti)(ti)取(qu)(qu)溫(wen)(wen)度和提(ti)(ti)取(qu)(qu)時間。研究發現(xian)黃(huang)酮(tong)(tong)類(lei)化(hua)合物(wu)提(ti)(ti)取(qu)(qu)4因素對提(ti)(ti)取(qu)(qu)效果的(de)影響主次(ci)順(shun)序(xu)為：超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)波(bo)(bo)功(gong)率(lv)(lv)(lv)>提(ti)(ti)取(qu)(qu)溫(wen)(wen)度>提(ti)(ti)取(qu)(qu)時間>料液比。王桃云等以(yi)料液比1∶25、70%乙(yi)醇、超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)波(bo)(bo)功(gong)率(lv)(lv)(lv)270W萃取(qu)(qu)豆莢20min，浸提(ti)(ti)3次(ci)，總黃(huang)酮(tong)(tong)類(lei)得率(lv)(lv)(lv)為8.49%，經(jing)分析產品有較強的(de)體外抗氧化(hua)活性。楊歡等以(yi)料液比1∶30、70%乙(yi)醇、超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)功(gong)率(lv)(lv)(lv)120W、70℃提(ti)(ti)取(qu)(qu)花生殼40min，加入4g/LSDS活性劑后(hou)，黃(huang)酮(tong)(tong)提(ti)(ti)取(qu)(qu)率(lv)(lv)(lv)達到2.15%，比單獨超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)提(ti)(ti)取(qu)(qu)提(ti)(ti)高了(le)51.4%。楊潔等[26]以(yi)料液比1∶30、76%乙(yi)醇、超(chao)(chao)(chao)聲(sheng)溫(wen)(wen)度51℃提(ti)(ti)取(qu)(qu)油菜蜂(feng)花粉(fen)33min，得率(lv)(lv)(lv)為1.89%，經(jing)HPLC進一步(bu)分析鑒定，油菜蜂(feng)花粉(fen)提(ti)(ti)取(qu)(qu)物(wu)中約有9種黃(huang)酮(tong)(tong)苷元，提(ti)(ti)取(qu)(qu)較為徹底。
3.微波輔助提(ti)取法
微波輔助提取法(fa)利用(yong)不同(tong)物質(zhi)吸收(shou)微波能(neng)(neng)力的差異，使得樣品中某些組分(fen)(fen)被(bei)選(xuan)擇性加(jia)熱，從而獲得巨大(da)能(neng)(neng)量，掙脫(tuo)束縛從基體物質(zhi)中分(fen)(fen)離出來。微波依據介質(zhi)性質(zhi)的不同(tong)，將產生反射、吸收(shou)以及(ji)穿透等現(xian)象，可快(kuai)速破壞細(xi)胞(bao)壁，直接作用(yong)于(yu)分(fen)(fen)子(zi)，加(jia)劇分(fen)(fen)子(zi)之間的碰撞、擠壓，使有效成分(fen)(fen)快(kuai)速浸出。
影響微(wei)波輔(fu)助法(fa)(fa)(fa)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)效(xiao)果的因(yin)素主要有提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)溶劑(ji)、提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)時(shi)間、微(wei)波功(gong)率(lv)(lv)、提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)溫度(du)(du)等(deng)。與傳(chuan)統溶劑(ji)相比(bi)，微(wei)波輔(fu)助提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)能(neng)在極(ji)短時(shi)間萃取(qu)(qu)(qu)更高(gao)含量(liang)(liang)的大豆異(yi)(yi)黃(huang)酮(tong)，且提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)物(wu)(wu)活性較好。王(wang)舒等(deng)以微(wei)波和(he)溶劑(ji)法(fa)(fa)(fa)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)豆粕中異(yi)(yi)黃(huang)酮(tong)，******條(tiao)件下得率(lv)(lv)分(fen)別為(wei)(wei)26.86、7.518mg/g，微(wei)波法(fa)(fa)(fa)得率(lv)(lv)明(ming)顯(xian)高(gao)于溶劑(ji)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)的。對大豆中大豆黃(huang)素和(he)染料木(mu)素的回(hui)收(shou)率(lv)(lv)進行探究發現(xian)二者回(hui)收(shou)率(lv)(lv)高(gao)達(94±8)%和(he)(97±5)%。運(yun)用該法(fa)(fa)(fa)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)花生殼中黃(huang)酮(tong)成分(fen)時(shi)，與乙醇回(hui)流法(fa)(fa)(fa)相比(bi)，提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)時(shi)間由(you)(you)4h縮短至4min，黃(huang)酮(tong)類化合(he)(he)物(wu)(wu)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)量(liang)(liang)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)高(gao)了(le)2.4倍。以料液比(bi)1∶30、功(gong)率(lv)(lv)515W微(wei)波輻(fu)照花生殼120s，黃(huang)酮(tong)類化合(he)(he)物(wu)(wu)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)率(lv)(lv)高(gao)達83.7%。研究此法(fa)(fa)(fa)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)花生殼所得黃(huang)酮(tong)成分(fen)的抗氧化性，發現(xian)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)物(wu)(wu)對羥(qian)自(zi)由(you)(you)基(ji)(ji)(ji)、超氧陰離(li)子自(zi)由(you)(you)基(ji)(ji)(ji)和(he)DPPH自(zi)由(you)(you)基(ji)(ji)(ji)的清(qing)除值分(fen)別為(wei)(wei)0.78、6.66、5.12mg/mL，抗氧化性較高(gao)。采用此法(fa)(fa)(fa)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)油菜花粉中總(zong)黃(huang)酮(tong)，******條(tiao)件下提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取(qu)(qu)(qu)率(lv)(lv)為(wei)(wei)(2.64±0.05)%;進一步分(fen)析發現(xian)，DPPH自(zi)由(you)(you)基(ji)(ji)(ji)半清(qing)除質量(liang)(liang)濃度(du)(du)為(wei)(wei)0.325mg/mL。
微(wei)波輔助提(ti)取(qu)(qu)法加熱迅速，操作簡便，與傳統(tong)有(you)機溶劑提(ti)取(qu)(qu)法相比，極大縮短了(le)提(ti)取(qu)(qu)時(shi)間，因(yin)(yin)此(ci)可(ke)避免高溫對有(you)效成(cheng)(cheng)分(fen)的破壞，使(shi)提(ti)取(qu)(qu)物保(bao)持良好的抗氧化活(huo)性。但該法不適于提(ti)取(qu)(qu)熱敏(min)性成(cheng)(cheng)分(fen)，因(yin)(yin)為微(wei)波加熱會導致(zhi)這(zhe)些成(cheng)(cheng)分(fen)的變性、失活(huo)，此(ci)外，提(ti)取(qu)(qu)物中可(ke)能會有(you)溶劑殘留，且微(wei)波穿透原料內部時(shi)其強度會發生衰減(jian)，這(zhe)些問(wen)題仍亟待(dai)解決。
4.超臨界流體萃取法(fa)
超臨界(jie)(jie)(jie)流(liu)(liu)體萃(cui)(cui)取(qu)(qu)技術(shu)利用(yong)(yong)不同(tong)密度超臨界(jie)(jie)(jie)流(liu)(liu)體對(dui)物質溶(rong)(rong)解(jie)(jie)能力的(de)(de)(de)(de)差異(yi)(yi)，達(da)(da)到(dao)分(fen)離純(chun)(chun)化(hua)的(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)。CO2價(jia)格低廉、性質穩定、安(an)全(quan)無(wu)毒，是(shi)超臨界(jie)(jie)(jie)流(liu)(liu)體萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法常用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)之一。但(dan)是(shi)由于萃(cui)(cui)取(qu)(qu)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)極性弱、溶(rong)(rong)解(jie)(jie)能力差，容易(yi)導(dao)致提(ti)(ti)取(qu)(qu)率低。在超臨界(jie)(jie)(jie)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)的(de)(de)(de)(de)同(tong)時(shi)，引(yin)入(ru)夾帶(dai)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)或(huo)采取(qu)(qu)多級萃(cui)(cui)取(qu)(qu)、分(fen)離和連續固體處(chu)理等(deng)(deng)(deng)技術(shu)，可(ke)解(jie)(jie)決這(zhe)些問題(ti);夾帶(dai)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)還有(you)助于實現粗提(ti)(ti)物的(de)(de)(de)(de)分(fen)離純(chun)(chun)化(hua)。常用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)夾帶(dai)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)有(you)乙醇(chun)、水和甲醇(chun)等(deng)(deng)(deng)。將80%改性甲醇(chun)作(zuo)為(wei)助溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)，******條件(jian)下豆(dou)粕(po)異(yi)(yi)黃酮(tong)回收率高(gao)達(da)(da)87.3%;Yu等(deng)(deng)(deng)以(yi)大(da)豆(dou)胚軸(zhou)為(wei)提(ti)(ti)取(qu)(qu)原料(liao)，以(yi)35MPa、CO2流(liu)(liu)速5L/min在45℃萃(cui)(cui)取(qu)(qu)2h，異(yi)(yi)黃酮(tong)提(ti)(ti)取(qu)(qu)率為(wei)21.8mg/g;Pyo等(deng)(deng)(deng)對(dui)此法和有(you)機溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)大(da)豆(dou)異(yi)(yi)黃酮(tong)的(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)率進行比較(jiao)，二者染料(liao)木素的(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)率分(fen)別為(wei)0.6599mg/g和0.6763mg/g，雖然前者比后者稍低，但(dan)前者樣品處(chu)理步(bu)驟(zou)少(shao)，樣品損失少(shao)，無(wu)有(you)機溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)參與，安(an)全(quan)清潔;王哲等(deng)(deng)(deng)對(dui)大(da)豆(dou)異(yi)(yi)黃酮(tong)的(de)(de)(de)(de)溶(rong)(rong)劑(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法、超臨界(jie)(jie)(jie)流(liu)(liu)體萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法、超聲(sheng)波(bo)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法以(yi)及(ji)微(wei)波(bo)萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法進行了對(dui)比研究(jiu)，結(jie)果表明超臨界(jie)(jie)(jie)流(liu)(liu)體萃(cui)(cui)取(qu)(qu)法提(ti)(ti)取(qu)(qu)率和純(chun)(chun)度高(gao)，清潔高(gao)效，但(dan)對(dui)設備要求較(jiao)高(gao)。
超臨(lin)界(jie)流體(ti)萃取(qu)法(fa)選擇性好、回(hui)收率高(gao)、能耗低，作用時(shi)間短，能避免(mian)高(gao)溫對黃酮(tong)類化合(he)物的破(po)壞。目前(qian)此法(fa)在(zai)(zai)(zai)提取(qu)大豆(dou)異(yi)黃酮(tong)中(zhong)展現了諸多優越性，但其在(zai)(zai)(zai)花生和油(you)菜(cai)籽等其他油(you)料作物中(zhong)應用較(jiao)少，主(zhu)要是因為此法(fa)工(gong)藝(yi)復雜，花生和油(you)菜(cai)花粉中(zhong)黃酮(tong)成(cheng)分(fen)含量(liang)有限，提取(qu)成(cheng)本(ben)較(jiao)高(gao)，因此若超臨(lin)界(jie)流體(ti)萃取(qu)法(fa)能改善工(gong)藝(yi)、降低成(cheng)本(ben)，則必將在(zai)(zai)(zai)黃酮(tong)成(cheng)分(fen)的提取(qu)中(zhong)發(fa)揮優勢。
5.其他提取方法(fa)
黃(huang)(huang)酮(tong)(tong)類化合(he)物的(de)(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)方(fang)法(fa)(fa)(fa)還有(you)很(hen)多，如酶(mei)提(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)、半仿(fang)(fang)生提(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)等。酶(mei)提(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)安全高效、反應(ying)條(tiao)件溫和、專一(yi)性強(qiang)，主要應(ying)用于黃(huang)(huang)酮(tong)(tong)物質(zhi)(zhi)被(bei)細胞(bao)壁包裹不易(yi)提(ti)(ti)取(qu)(qu)的(de)(de)(de)(de)(de)物料(liao)，如山楂等，酶(mei)解破(po)除細胞(bao)壁后，黃(huang)(huang)酮(tong)(tong)物質(zhi)(zhi)充分(fen)(fen)暴(bao)露，更易(yi)被(bei)充分(fen)(fen)提(ti)(ti)取(qu)(qu)。半仿(fang)(fang)生提(ti)(ti)取(qu)(qu)法(fa)(fa)(fa)是一(yi)種(zhong)新型的(de)(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)方(fang)法(fa)(fa)(fa)，此法(fa)(fa)(fa)模(mo)擬口服給藥(yao)及藥(yao)物在(zai)胃腸道中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)轉運過(guo)程，對(dui)原料(liao)進行連續提(ti)(ti)取(qu)(qu)，在(zai)藥(yao)物中(zhong)(zhong)黃(huang)(huang)酮(tong)(tong)成分(fen)(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)發揮了較(jiao)大(da)優勢。對(dui)這(zhe)兩種(zhong)技術在(zai)油料(liao)作物中(zhong)(zhong)黃(huang)(huang)酮(tong)(tong)成分(fen)(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)提(ti)(ti)取(qu)(qu)和應(ying)用，期待有(you)深入(ru)的(de)(de)(de)(de)(de)開發探究。
大(da)豆、花(hua)(hua)生(sheng)(sheng)(sheng)、油菜(cai)籽3種主(zhu)要油料作(zuo)(zuo)物(wu)中(zhong)黃酮(tong)類化(hua)合物(wu)的(de)(de)(de)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取，有(you)機溶(rong)劑(ji)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取法(fa)應用(yong)最廣(guang)，已經(jing)實現(xian)了(le)工業化(hua)，但提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取溫度較(jiao)(jiao)高(gao)，耗時較(jiao)(jiao)長，容易破壞提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取物(wu)的(de)(de)(de)活性。超聲(sheng)波輔(fu)(fu)助提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取法(fa)和微波輔(fu)(fu)助提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取法(fa)在提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取大(da)豆、花(hua)(hua)生(sheng)(sheng)(sheng)、油菜(cai)籽中(zhong)黃酮(tong)時均展現(xian)了(le)諸(zhu)多優勢(shi)(shi)，提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取效率高(gao)、安(an)全性好，能(neng)避免高(gao)溫對(dui)有(you)效成分(fen)的(de)(de)(de)破壞，保(bao)持其(qi)(qi)原有(you)活性。因此，溶(rong)劑(ji)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取與超聲(sheng)波、微波等其(qi)(qi)他(ta)技(ji)術(shu)聯用(yong)，是目前較(jiao)(jiao)好的(de)(de)(de)應用(yong)選(xuan)擇。超臨(lin)界流體萃(cui)(cui)取法(fa)在大(da)豆異黃酮(tong)的(de)(de)(de)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取中(zhong)優勢(shi)(shi)明顯，但生(sheng)(sheng)(sheng)產(chan)成本高(gao)，萃(cui)(cui)取工藝較(jiao)(jiao)為復(fu)雜。其(qi)(qi)他(ta)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取技(ji)術(shu)如酶提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取法(fa)、半仿生(sheng)(sheng)(sheng)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取法(fa)是優良(liang)的(de)(de)(de)新興(xing)工藝，很有(you)必要將其(qi)(qi)運用(yong)到油料作(zuo)(zuo)物(wu)中(zhong)黃酮(tong)類物(wu)質的(de)(de)(de)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取，但其(qi)(qi)提(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)取技(ji)術(shu)還有(you)待進行深入的(de)(de)(de)開發探(tan)究。